‘凤丹白’牡丹中参与受精过程的PobHLH基因的克隆与表达

李真#, 郝青#, 李伟, 刘庆超, 刘庆华, 王奎玲*
青岛农业大学园林与林学院, 山东青岛266109

通信作者:王奎玲;E-mail: wkl6310@163.com

摘 要:

以油用牡丹‘凤丹白’为试材, 基于已构建的雌蕊转录组数据库, 筛选出与双受精相关的bHLH基因同源性高的Unigene序列, 命名为PobHLH。其开放阅读框(ORF) 1 338 bp, 推测编码一个含有445个氨基酸的蛋白。序列分析表明, PobHLH编码的氨基酸序列中包含已确定的保守基序, 包括HLH结构域、 APB基序和核定位信号NLS。氨基酸序列比对发现PobHLH与拟南芥bHLH家族VII(a+b)亚组的AtUNE10相似度最高, 其次是同亚组的AtSPT和AtALC, 可能参与双受精中雌配子体的发育。荧光定量PCR分析表明PobHLH在授粉后24 h表达增量最高, 在授粉后48 h表达丰度最大, 与‘凤丹白’双受精时间进程相吻合, 暗示PobHLH可能在双受精过程中起关键作用。

关键词:油用牡丹‘凤丹白’; bHLH; 双受精; 基因克隆; 表达分析

收稿:2018-10-08   修定:2019-01-30

资助:国家自然科学基金(31601789)和山东省优秀中青年科学家科研奖励基金项目(BS2015SW017)

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